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透析袋的选择

日期: 2018-11-07
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1)选择合适的截留分子量。

截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为25。选择截留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留率。

分子量差超过100倍时,可以同时保证高收率和高纯度。

当分子量差10倍时,为了追求高收率,可以选择较低的截留分子量;为了追求高纯度,可以选择较高的截留分子量。如产品(Cyt C,20KD)和杂质(Vit B12,2KD),侧重收率,选择截留分子是产品分子量的80%-100%及提高收率,用截留分子量20KD的膜去分离Cyt C和Vit B12可得到约88%左右的收率,但仍含有12%左右的杂质。侧重纯度但牺牲收率,选用截留分子量高一些膜,样品保留率在50%-80%左右,用截留分子量为50KD的膜去分离Cyt C和Vit B12以达到收率76%左右和约有2%的B12存留。

对于需对几种分子进行分离的应用,分子之间的分子量差至少为5倍,才能完成有效的膜透析。若不能满足分子量差的要求,可能需要使用其它的分离技术,如色谱方法或切向流过滤。

2)选择适当的扁平宽度(体积)

透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15cm的透析袋。

3)选择适合的透析膜材质

每种膜对不同的分子具有不同的亲和性。对于球蛋白,相对的结合亲和性由低到高为CE<RC<PVDF。


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